Prepararea țesutului conjunctiv fibros dens încadrat. Histologie - Histology - infostraja.ro
Țesut meristematic Histologie medicală Histopatologia este ramura histologiei care include identificarea microscopică și studiul țesutului bolnav.
Este o parte importantă a patologiei anatomice și a patologiei chirurgicaledeoarece diagnosticul precis al cancerului și al altor boli necesită adesea examinarea histopatologică a probelor de țesut. Medicii instruiți, patologi autorizați frecventefectuează examinarea histopatologică și furnizează informații diagnostice pe baza observațiilor lor.
Ocupații Domeniul histologiei care include prepararea țesuturilor pentru examinarea microscopică este cunoscut sub numele de histotehnologie. Titlurile postului pentru personalul instruit care pregătesc specimenele histologice pentru examinare sunt numeroase și includ histotehnici, histotehnologi, tehnicieni și tehnologi în histologie, tehnicieni de laborator medical și oameni de știință biomedici. Fixare Articol principal: Fixare histologie Secțiunea histologică a unei nevertebrate fosilizate.
Briozoan ordovician.
Fixatorii chimici sunt utilizați pentru conservarea și menținerea structurii țesuturilor și celulelor; fixarea întărește, de asemenea, țesuturile care ajută la tăierea secțiunilor subțiri de țesut necesare pentru observare la microscop.
Fixativele conservă în general țesuturile și celulele prin reticulare ireversibilă a proteinelor.
Complexul tuturor simptomelor de mai sus se numește sindrom de displazie a țesutului conjunctiv SCDT.
Alți fixatori utilizați pentru microscopia electronică sunt tetroxidul de osmiu sau acetat de uranil. Acest proces, păstrând în același timp integritatea structurală a celulelor și a țesutului, poate afecta funcționalitatea biologică a proteinelor, în special a enzimelor.
Cu toate acestea, extracția și analiza acizilor nucleici și a proteinelor din țesuturile fixate în formalină, încorporate în parafină, sunt posibile folosind protocoale adecvate. Selecție și tăiere Selecția este alegerea țesutului relevant în cazurile în care nu este necesar să se pună întreaga Prepararea țesutului conjunctiv fibros dens încadrat de țesut originală prin prelucrare ulterioară.
Restul poate rămâne fixat în cazul în care trebuie examinat ulterior. Tunderea este tăierea probelor de țesut pentru a expune suprafețele relevante pentru secționarea ulterioară.
De asemenea, creează probe de țesut de dimensiuni adecvate pentru a se potrivi în casete. Încorporarea Țesuturile sunt încorporate într-un mediu mai dur, atât ca suport, cât și pentru a permite tăierea feliilor subțiri de țesut. În general, apa trebuie mai întâi îndepărtată din țesuturi deshidratare și înlocuită cu un mediu care fie se solidifică direct, fie cu un fluid intermediar curățare care este miscibil cu mediul de încorporare.
Ceară de parafină Eșantionul histologic fiind încorporat în ceară de parafină țesutul este ținut la fundul unei matrițe metalice și peste el se toarnă mai multă parafină topită pentru ao umple. Pentru microscopia cu lumină, ceara de parafină este cel mai frecvent utilizat material de încastrare.
Parafina este nemiscibilă cu apa, principalul constituent al țesutului biologic, deci trebuie mai întâi îndepărtată printr-o serie de etape de deshidratare. Deshidratarea este urmată de un agent de curățare de obicei xilen, deși sunt folosiți alți substituenți siguri pentru mediu care îndepărtează alcoolul și este miscibil cu ceara, în cele din urmă se adaugă parafină topită pentru a înlocui xilenul și pentru a se infiltra în țesut.
Funcția trofică: fiind localizată în jurul vaselor, pvst reglează metabolismul între sângele și țesuturile organelor. Funcția de protecție se datorează prezenței macrofagelor, plasmocitelor și leucocitelor în pvst. Antigenii care străpung I - bariera epitelială a corpului, se întâlnesc cu bariera II - celule nespecifice macrofage, granulocite neutrofile și apărare imunologică limfocite, macrofage, eozinofile.
În majoritatea laboratoarelor de histologie sau histopatologie, deshidratarea, curățarea și infiltrarea cu ceară sunt efectuate în procesoare de țesuturi care automatizează acest proces. Odată infiltrate în parafină, țesuturile sunt orientate în forme care sunt umplute cu ceară; odată poziționată, ceara este răcită, solidificând blocul și țesutul.
Alte materiale Parafina nu oferă întotdeauna o matrice suficient de dură pentru tăierea secțiunilor foarte subțiri care sunt deosebit de importante pentru microscopia electronică.
- Histologie - Histology - infostraja.ro
- (PDF) CURSUL 1 Sistemul nervos | Alexandru Muresan - infostraja.ro
Ceara de parafină poate fi, de asemenea, prea moale în raport cu țesutul, căldura ceară topită poate modifica Prepararea țesutului conjunctiv fibros dens încadrat în moduri nedorite sau substanțele chimice de deshidratare sau de curățare pot dăuna țesutului. Alternative la parafină includ epoxidicacrilicagargelatinăcelloidină și alte tipuri de ceruri.
În microscopia electronică, rășinile epoxidice sunt cele mai utilizate medii de încorporare, dar sunt utilizate și rășini acrilice, în special acolo unde este necesară imunohistochimia. Pentru ca țesuturile să fie tăiate în stare înghețată, țesuturile sunt plasate într-un mediu de încorporare pe bază de apă. Țesuturile pre-congelate sunt plasate în forme cu materialul lichid de încorporare, de obicei un glicol pe bază de apă, OCTTBSCryogel sau rășină, care este apoi înghețat pentru a forma blocuri întărite.
Secționarea Articol principal: Microtom Eșantion histologic tăiat pe un microtom. Pentru microscopie cu lumină, un cuțit montat într-un microtom inflamația genunchiului piciorului utilizat pentru a tăia secțiuni de țesut de obicei între micrometri grosime care sunt montate pe o lamă de microscop de sticlă. Pentru microscopia electronică de transmisie TEM Forumul pentru tratamentul artritei, un cuțit de diamant sau de sticlă montat într-un ultramicrotom este utilizat pentru a Prepararea țesutului conjunctiv fibros dens încadrat între secțiuni de țesut gros de nanometri.
Pătarea Articol principal: Colorare Țesutul biologic are un contrast inerent mic, fie în microscopul luminos, fie în cel electronic. Colorarea este utilizată pentru a da atât contrast cu țesutul, cât și pentru a evidenția caracteristicile particulare de interes. Când pata este utilizată pentru a viza o anumită componentă chimică a țesutului și nu structura generalăse folosește termenul histochimie.
Microscopie cu lumină Colorarea tricromă a lui Masson pe traheea șobolanilor. Hematoxilina colorează nucleii celulelor în albastru; eozina, un colorant acidcolorează citoplasma și alte țesuturi în diferite pete de roz. O tehnică histochimică efectuată în mod obișnuit care vizează o substanță chimică specifică este reacția albastră prusiană a lui Perlsutilizată pentru a demonstra depozitele de fier în boli precum hemocromatoza. Metoda Nissl pentru substanța Nissl și metoda lui Golgi și petele de argint înrudite sunt utile în identificarea neuronilor sunt alte exemple de pete mai specifice.
Istoradiografie În istoradiografieo lamelă uneori colorată histochimic este radiografiată. Mai frecvent, autoradiografia este utilizată în vizualizarea locațiilor către care a fost transportată o substanță radioactivă în corp, cum ar fi celulele în faza S supuse replicării ADN care încorporează timidină tritiată sau site-uri la care sondele de acid nucleic marcate radio se leagă in situ hibridizare.
Pentru autoradiografie la nivel microscopic, diapozitivul este de obicei scufundat în emulsia lichidă a tractului nuclear, care se usucă pentru a forma pelicula de expunere. Boabele de argint individuale din film sunt vizualizate cu microscopie pe câmp întunecat. Imunohistochimie Articol principal: imunohistochimie Recent, anticorpii au fost folosiți pentru a vizualiza în mod Prepararea țesutului conjunctiv fibros dens încadrat proteinele, carbohidrații și lipidele.
Acest proces se numește imunohistochimie sau, atunci când pata este o moleculă fluorescentăimunofluorescența. Această tehnică a crescut foarte mult capacitatea de a identifica categorii de celule la microscop. Alte tehnici avansate, cum ar fi hibridizarea non-radioactivă in situpot fi combinate cu imunochimie pentru a identifica molecule specifice de ADN sau ARN cu sonde fluorescente sau etichete care pot fi utilizate pentru imunofluorescență și amplificarea fluorescenței legate de enzime în special amplificarea semnalului cu fosfatază alcalină și tiramidă.
Țesut (biologie)
Microscopia fluorescentă și microscopia confocală sunt utilizate pentru a detecta semnale fluorescente cu detalii intracelulare bune. Microscopie electronică Pentru microscopia electronică, metalele grele sunt de obicei utilizate pentru colorarea secțiunilor de țesut.
- Țesut (biologie) - Wikipedia
- Гляди внимательно, Олвин, -- предупредил .
- Durere în articulațiile picioarelor cu un brusture
Acetat de uranil și citrat de plumb sunt utilizate în mod obișnuit pentru a conferi contrast țesutului la microscopul electronic. Tehnici specializate Articol principal: Procedura secțiunii înghețate Similar procedurii de secțiune înghețată folosită în medicină, criosecțiunea este o metodă de înghețare, tăiere și montare rapidă a secțiunilor de țesut pentru histologie.
Țesutul este de obicei secționat pe un criostat sau un microtom înghețat.
Secțiunile înghețate sunt montate pe o lamă de sticlă și pot fi colorate pentru a spori contrastul între diferite țesuturi. Secțiunile înghețate nefixate pot fi utilizate pentru studii care necesită localizarea enzimei în țesuturi și celule.
Fixarea țesuturilor este necesară pentru anumite proceduri, cum ar fi colorarea imunofluorescenței legate de anticorpi. Secțiunile înghețate sunt adesea pregătite în timpul îndepărtării chirurgicale a tumorilor pentru a permite identificarea rapidă a marginilor tumorale, ca în intervenția chirurgicală Mohssau determinarea malignității tumorale, atunci când o tumoră este descoperită incidental în timpul intervenției chirurgicale. Ultramicrotomie Articol principal: Ultramicrotomie Ultramicrotomia este o metodă de pregătire a secțiunilor extrem de subțiri pentru analiza microscopului electronic cu transmisie TEM.
Țesuturile sunt în mod obișnuit încorporate în rășini epoxidice sau de altă natură. Secțiuni foarte subțiri mai puțin de 0,1 micrometri grosime sunt tăiate cu ajutorul cuțitelor de diamant sau de sticlă pe un ultramicrotom.
Artefacte Artefactele sunt structuri sau caracteristici ale țesutului care interferează cu examenul histologic normal. Artefactele interferează cu histologia schimbând aspectul țesuturilor și ascunzând structurile.
Artefactele de prelucrare a țesuturilor pot include pigmenți formați de fixatori, contracție, spălarea componentelor celulare, modificări de culoare în diferite tipuri de țesuturi și modificări ale structurilor din țesut.
Un exemplu este pigmentul de mercur lăsat în urmă după ce a folosit fixatorul Zenker pentru a repara o secțiune.
